2026/03/20 更新

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ナカイ ヒロユキ
中井 博之
NAKAI Hiroyuki
所属
教育研究院 自然科学系 農学系列 准教授
農学部 農学科 准教授
職名
准教授
外部リンク

学位

  • 博士(農学) ( 2005年3月   北海道大学 )

研究キーワード

  • 物質生産

  • 酵素化学

  • 糖質科学

研究分野

  • ライフサイエンス / 応用生物化学

  • ライフサイエンス / 食品科学

経歴(researchmap)

  • 新潟大学   農学部 応用生物化学科   准教授

    2015年4月 - 現在

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  • 新潟大学   大学院自然科学研究科   助教

    2010年12月 - 2015年3月

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  • 独立行政法人 農業・食品産業技術総合研究機構 食品総合研究所   農研機構特別研究員

    2010年10月 - 2010年11月

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  • デンマーク工科大学   助教

    2008年9月 - 2010年9月

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  • デンマーク工科大学   博士研究員

    2007年9月 - 2008年8月

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  • 北海道大学   大学院農学研究科   博士研究員

    2005年4月 - 2007年9月

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経歴

  • 新潟大学   農学部 農学科   准教授

    2017年4月 - 現在

  • 新潟大学   自然科学研究科 生命・食料科学専攻 応用生命・食品科学   准教授

    2015年4月 - 2017年3月

  • 新潟大学   応用生物化学科   准教授

    2015年4月 - 2017年3月

  • 新潟大学   経営戦略本部 若手研究者育成推進室   助教

    2010年12月 - 2015年3月

学歴

  • 北海道大学   大学院農学研究科   応用生命科学専攻

    - 2005年3月

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    国名: 日本国

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  • 北海道大学   農学部   応用生命科学科

    - 2000年3月

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    国名: 日本国

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所属学協会

 

論文

  • 多様化するGH186の反応機構の中から見つかったアノマー反転型transglycosylation

    元内 省, 今場 司朗, 小林 海渡, 中井 博之, 中島 将博

    応用糖質科学:日本応用糖質科学会誌   15 ( 2 )   70 - 78   2025年5月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:一般社団法人 日本応用糖質科学会  

    Osmoregulated periplasmic glucans(OPG)は,プロテオバクテリア門を中心に様々な微生物が生物間相互作用に関わる因子としてペリプラズムや細胞外に合成する糖鎖である.これらの多くはβ-1,2-グルカンを共通の主鎖とする一方でその詳細な構造は多様性に富んでおり,その合成に関わる酵素群の多くは未同定であった.本総説ではOPGの合成酵素ファミリーとして筆者らが発見したGH186のうち,ユニークな反応経路が提唱された反転型エンドβ-1,2-グルカナーゼであるEcOpgD(大腸菌由来GH186)と,反転型transglycosylaseであるXccOpgD(<i>Xanthomonas campestris</i> pv. <i>campestris</i>由来GH186)に関して機能と構造の両面で紹介する.特にGHにおいて極めて稀な反転型transglycosylaseがどのような経緯で見つかったのかを紹介し,また,なぜその反応が可能であるのかについて反転型β-1,2-グルカナーゼであるGH162との比較も踏まえて考察する.

    DOI: 10.5458/bag.15.2_70

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    その他リンク: https://ndlsearch.ndl.go.jp/books/R000000004-I034213233

  • Discovery of Anomer-Inverting Transglycosylase: Cyclic Glucohexadecaose-Producing Enzyme from Xanthomonas, a Phytopathogen. 査読 国際誌

    Sei Motouchi, Shiro Komba, Hiroyuki Nakai, Masahiro Nakajima

    Journal of the American Chemical Society   146 ( 26 )   17738 - 17746   2024年7月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    Various Xanthomonas species cause well-known plant diseases. Among various pathogenic factors, the role of α-1,6-cyclized β-1,2-glucohexadecaose (CβG16α) produced by Xanthomonas campestris pv. campestris was previously shown to be vital for infecting model organisms, Arabidopsis thaliana and Nicotiana benthamiana. However, enzymes responsible for biosynthesizing CβG16α are essentially unknown, which limits the generation of agrichemicals that inhibit CβG16α synthesis. In this study, we discovered that OpgD from X. campestris pv. campestris converts linear β-1,2-glucan to CβG16α. Structural and functional analyses revealed OpgD from X. campestris pv. campestris possesses an anomer-inverting transglycosylation mechanism, which is unprecedented among glycoside hydrolase family enzymes.

    DOI: 10.1021/jacs.4c02579

    PubMed

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  • Structural and biochemical analysis of family 92 carbohydrate-binding modules uncovers multivalent binding to β-glucans 査読

    Meng-Shu Hao, Scott Mazurkewich, He Li, Alma Kvammen, Srijani Saha, Salla Koskela, Annie R. Inman, Masahiro Nakajima, Nobukiyo Tanaka, Hiroyuki Nakai, Gisela Brändén, Vincent Bulone, Johan Larsbrink, Lauren S. McKee

    Nature Communications   15 ( 1 )   2024年4月

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    掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:Springer Science and Business Media LLC  

    Abstract

    Carbohydrate-binding modules (CBMs) are non-catalytic proteins found appended to carbohydrate-active enzymes. Soil and marine bacteria secrete such enzymes to scavenge nutrition, and they often use CBMs to improve reaction rates and retention of released sugars. Here we present a structural and functional analysis of the recently established CBM family 92. All proteins analysed bind preferentially to β−1,6-glucans. This contrasts with the diversity of predicted substrates among the enzymes attached to CBM92 domains. We present crystal structures for two proteins, and confirm by mutagenesis that tryptophan residues permit ligand binding at three distinct functional binding sites on each protein. Multivalent CBM families are uncommon, so the establishment and structural characterisation of CBM92 enriches the classification database and will facilitate functional prediction in future projects. We propose that CBM92 proteins may cross-link polysaccharides in nature, and might have use in novel strategies for enzyme immobilisation.

    DOI: 10.1038/s41467-024-47584-y

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    その他リンク: https://www.nature.com/articles/s41467-024-47584-y

  • Functional and structural analysis of a cyclization domain in a cyclic β-1,2-glucan synthase 査読

    Nobukiyo Tanaka, Ryotaro Saito, Kaito Kobayashi, Hiroyuki Nakai, Shogo Kamo, Kouji Kuramochi, Hayao Taguchi, Masahiro Nakajima, Tomoko Masaike

    Applied Microbiology and Biotechnology   108 ( 1 )   2024年2月

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    掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:Springer Science and Business Media LLC  

    Abstract

    Cyclic β-1,2-glucan synthase (CGS) is a key enzyme in production of cyclic β-1,2-glucans (CβGs) which are involved in bacterial infection or symbiosis to host organisms. Nevertheless, a mechanism of cyclization, the final step in the CGS reaction, has not been fully understood. Here we performed functional and structural analyses of the cyclization domain of CGS alone from Thermoanaerobacter italicus (TiCGS<sub>Cy</sub>). We first found that β-glucosidase-resistant compounds are produced by TiCGS<sub>Cy</sub> with linear β-1,2-glucans as substrates. The <sup>1</sup>H-NMR analysis revealed that these products are CβGs. Next, action pattern analyses using β-1,2-glucooligosaccharides revealed a unique reaction pattern: exclusive transglycosylation without hydrolysis and a hexasaccharide being the minimum length of the substrate. These analyses also showed that longer substrate β-1,2-glucooligosaccharides are preferred, being consistent with the fact that CGSs generally produce CβGs with degrees of polymerization of around 20. Finally, the overall structure of the cyclization domain of TiCGS<sub>Cy</sub> was found to be similar to those of β-1,2-glucanases in phylogenetically different groups. Meanwhile, the identified catalytic residues indicated clear differences in the reaction pathways between these enzymes. Overall, we propose a novel reaction mechanism of TiCGS<sub>Cy</sub>. Thus, the present group of CGSs defines a new glycoside hydrolase family, GH189.

    Key points

    • It was clearly evidenced that cyclization domain alone produces cyclic β-1,2-glucans.

    • The domain exclusively catalyzes transglycosylation without hydrolysis.

    • The present catalytic domain defines as a new glycoside hydrolase family 189.

    Graphical Abstract

    DOI: 10.1007/s00253-024-13013-9

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    その他リンク: https://link.springer.com/article/10.1007/s00253-024-13013-9/fulltext.html

  • Efficient Synthesis of β-Glucose 1-Phosphate through Enzymatic Phosphorolysis and Baker's Yeast Fermentation.

    Sofia Koltovskaia, Akane Ohtao, Motomitsu Kitaoka, Hiroyuki Nakai, Takanori Nihira

    Journal of applied glycoscience   71 ( 4 )   123 - 125   2024年

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    β-Glucose 1-phosphate (βGlc1P) is a donor substrate in the synthesis of various α-glucosides by glycoside phosphorylases belonging to the glycoside hydrolase family 65. This study presents an efficient synthesis of βGlc1P combining enzymatic phosphorolysis of inexpensive maltose and baker's yeast fermentation to bias the equilibrium toward maltose phosphorolysis by removing released glucose. Mass production of βGlc1P was obtained in a 2 L reaction mixture initially containing 500 mM maltose and inorganic phosphate, with a yield of 76 %. βGlc1P was isolated from the reaction mixture by crystallization after electrodialysis to obtain 181 g of βGlc1P as a bis(cyclohexylammonium) salt.

    DOI: 10.5458/jag.jag.JAG-2024_0008

    PubMed

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  • Identification of enzymatic functions of osmo-regulated periplasmic glucan biosynthesis proteins from Escherichia coli reveals a novel glycoside hydrolase family 査読

    Sei Motouchi, Kaito Kobayashi, Hiroyuki Nakai, Masahiro Nakajima

    Communications Biology   6 ( 1 )   2023年9月

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    掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:Springer Science and Business Media LLC  

    Abstract

    Most Gram-negative bacteria synthesize osmo-regulated periplasmic glucans (OPG) in the periplasm or extracellular space. Pathogenicity of many pathogens is lost by knocking out opgG, an OPG-related gene indispensable for OPG synthesis. However, the biochemical functions of OpgG and OpgD, a paralog of OpgG, have not been elucidated. In this study, structural and functional analyses of OpgG and OpgD from Escherichia coli revealed that these proteins are β-1,2-glucanases with remarkably different activity from each other, establishing a new glycoside hydrolase family, GH186. Furthermore, a reaction mechanism with an unprecedentedly long proton transfer pathway among glycoside hydrolase families is proposed for OpgD. The conformation of the region that forms the reaction pathway differs noticeably between OpgG and OpgD, which explains the observed low activity of OpgG. The findings enhance our understanding of OPG biosynthesis and provide insights into functional diversity for this novel enzyme family.

    DOI: 10.1038/s42003-023-05336-6

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    その他リンク: https://www.nature.com/articles/s42003-023-05336-6

  • Cleavage of α-1,4-glycosidic linkages by the glycosylphosphatidylinositol-anchored α-amylase AgtA decreases the molecular weight of cell wall α-1,3-glucan in Aspergillus oryzae 査読

    Ami Koizumi, Ken Miyazawa, Makoto Ogata, Yuzuru Takahashi, Shigekazu Yano, Akira Yoshimi, Motoaki Sano, Masafumi Hidaka, Takanori Nihira, Hiroyuki Nakai, Satoshi Kimura, Tadahisa Iwata, Keietsu Abe

    Frontiers in Fungal Biology   3   Article 1061841   2023年1月

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    掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:Frontiers Media SA  

    Aspergillus fungi contain α-1,3-glucan with a low proportion of α-1,4-glucan as a major cell wall polysaccharide. Glycosylphosphatidylinositol (GPI)-anchored α-amylases are conserved in Aspergillus fungi. The GPI-anchored α-amylase AmyD in Aspergillus nidulans has been reported to directly suppress the biosynthesis of cell wall α-1,3-glucan but not to degrade it in vivo. However, the detailed mechanism of cell wall α-1,3-glucan biosynthesis regulation by AmyD remains unclear. Here we focused on AoAgtA, which is encoded by the Aspergillus oryzae agtA gene, an ortholog of the A. nidulans amyD gene. Similar to findings in A. nidulans, agtA overexpression in A. oryzae grown in submerged culture decreased the amount of cell wall α-1,3-glucan and led to the formation of smaller hyphal pellets in comparison with the wild-type strain. We analyzed the enzymatic properties of recombinant (r)AoAgtA produced in Pichia pastoris and found that it degraded soluble starch, but not linear bacterial α-1,3-glucan. Furthermore, rAoAgtA cleaved 3-α-maltotetraosylglucose with a structure similar to the predicted boundary structure between the α-1,3-glucan main chain and a short spacer composed of α-1,4-linked glucose residues in cell wall α-1,3-glucan. Interestingly, rAoAgtA randomly cleaved only the α-1,4-glycosidic bonds of 3-α-maltotetraosylglucose, indicating that AoAgtA may cleave the spacer in cell wall α-1,3-glucan. Consistent with this hypothesis, heterologous overexpression of agtA in A. nidulans decreased the molecular weight of cell wall α-1,3-glucan. These in vitro and in vivo properties of AoAgtA suggest that GPI-anchored α-amylases can degrade the spacer α-1,4-glycosidic linkages in cell wall α-1,3-glucan before its insolubilization, and this spacer cleavage decreases the molecular weight of cell wall α-1,3-glucan in vivo.

    DOI: 10.3389/ffunb.2022.1061841

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  • Characterization and structural analyses of a novel glycosyltransferase acting on the β-1,2-glucosidic linkages 査読

    Kaito Kobayashi, Hisaka Shimizu, Nobukiyo Tanaka, Kouji Kuramochi, Hiroyuki Nakai, Masahiro Nakajima, Hayao Taguchi

    Journal of Biological Chemistry   298 ( 3 )   101606 - 101606   2022年3月

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    掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:Elsevier BV  

    DOI: 10.1016/j.jbc.2022.101606

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  • Discovery of solabiose phosphorylase and its application for enzymatic synthesis of solabiose from sucrose and lactose 査読

    Wataru Saburi, Takanori Nihira, Hiroyuki Nakai, Motomitsu Kitaoka, Haruhide Mori

    Scientific Reports   12 ( 1 )   259   2022年1月

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    掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:Springer Science and Business Media LLC  

    <title>Abstract</title>Glycoside phosphorylases (GPs), which catalyze the reversible phosphorolysis of glycosides, are promising enzymes for the efficient production of glycosides. Various GPs with new catalytic activities are discovered from uncharacterized proteins phylogenetically distant from known enzymes in the past decade. In this study, we characterized <italic>Paenibacillus borealis</italic> PBOR_28850 protein, belonging to glycoside hydrolase family 94. Screening of acceptor substrates for reverse phosphorolysis, in which α-<sc>d</sc>-glucose 1-phosphate was used as the donor substrate, revealed that the recombinant PBOR_28850 produced in <italic>Escherichia coli</italic> specifically utilized <sc>d</sc>-galactose as an acceptor and produced solabiose (β-<sc>d</sc>-Glc<italic>p</italic>-(1 → 3)-<sc>d</sc>-Gal). This indicates that PBOR_28850 is a new GP, solabiose phosphorylase. PBOR_28850 catalyzed the phosphorolysis and synthesis of solabiose through a sequential bi-bi mechanism involving the formation of a ternary complex. The production of solabiose from lactose and sucrose has been established. Lactose was hydrolyzed to <sc>d</sc>-galactose and <sc>d</sc>-glucose by β-galactosidase. Phosphorolysis of sucrose and synthesis of solabiose were then coupled by adding sucrose, sucrose phosphorylase, and PBOR_28850 to the reaction mixture. Using 210 mmol lactose and 280 mmol sucrose, 207 mmol of solabiose was produced. Yeast treatment degraded the remaining monosaccharides and sucrose without reducing solabiose. Solabiose with a purity of 93.7% was obtained without any chromatographic procedures.

    DOI: 10.1038/s41598-021-04421-2

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    その他リンク: https://www.nature.com/articles/s41598-021-04421-2

  • Enzymatic control and evaluation of degrees of polymerization of β-(1→2)-glucans 査読

    Masahiro Nakajima, Nobukiyo Tanaka, Kaito Kobayashi, Hiroyuki Nakai, Satoshi Kimura, Tadahisa Iwata, Hayao Taguchi

    Analytical Biochemistry   632   114366 - 114366   2021年11月

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    掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:Elsevier BV  

    DOI: 10.1016/j.ab.2021.114366

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  • Structure of a bacterial α-1,2-glucosidase defines mechanisms of hydrolysis and substrate specificity in GH65 family hydrolases. 査読 国際誌

    Shuntaro Nakamura, Takanori Nihira, Rikuya Kurata, Hiroyuki Nakai, Kazumi Funane, Enoch Y Park, Takatsugu Miyazaki

    The Journal of biological chemistry   297 ( 6 )   101366 - 101366   2021年10月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    Glycoside hydrolase family 65 (GH65) comprises glycoside hydrolases (GHs) and glycoside phosphorylases (GPs) that act on α-glucosidic linkages in oligosaccharides. All previously reported bacterial GH65 enzymes are GPs, whereas all eukaryotic GH65 enzymes known are GHs. In addition, to date, no crystal structure of a GH65 GH has yet been reported. In this study, we use biochemical experiments and X-ray crystallography to examine the function and structure of a GH65 enzyme from Flavobacterium johnsoniae (FjGH65A) that shows low amino acid sequence homology to reported GH65 enzymes. We found that FjGH65A does not exhibit phosphorolytic activity, but it does hydrolyze kojibiose (α-1,2-glucobiose) and oligosaccharides containing a kojibiosyl moiety without requiring inorganic phosphate. In addition, stereochemical analysis demonstrated that FjGH65A catalyzes this hydrolytic reaction via an anomer-inverting mechanism. The three-dimensional structures of FjGH65A in native form and in complex with glucose were determined at resolutions of 1.54 and 1.40 Å resolutions, respectively. The overall structure of FjGH65A resembled those of other GH65 GPs, and the general acid catalyst Glu472 was conserved. However, the amino acid sequence forming the phosphate-binding site typical of GH65 GPs was not conserved in FjGH65A. Moreover, FjGH65A had the general base catalyst Glu616 instead, which is required to activate a nucleophilic water molecule. These results indicate that FjGH65A is an α-1,2-glucosidase and is the first bacterial GH found in the GH65 family.

    DOI: 10.1016/j.jbc.2021.101366

    PubMed

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  • Next-generation prebiotic promotes selective growth of bifidobacteria, suppressing Clostridioides difficile 査読 国際誌

    Rika Hirano, Mikiyasu Sakanaka, Kazuto Yoshimi, Naohisa Sugimoto, Syogo Eguchi, Yuko Yamauchi, Misaki Nara, Shingo Maeda, Yuta Ami, Aina Gotoh, Takane Katayama, Noriho Iida, Tamotsu Kato, Hiroshi Ohno, Satoru Fukiya, Atsushi Yokota, Mamoru Nishimoto, Motomitsu Kitaoka, Hiroyuki Nakai, Shin Kurihara

    Gut Microbes   13 ( 1 )   1973835 - 1973835   2021年1月

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    担当区分:責任著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:Informa UK Limited  

    Certain existing prebiotics meant to facilitate the growth of beneficial bacteria in the intestine also promote the growth of other prominent bacteria. Therefore, the growth-promoting effects of β-galactosides on intestinal bacteria were analyzed. Galactosyl-β1,4-l-rhamnose (Gal-β1,4-Rha) selectively promoted the growth of Bifidobacterium. Bifidobacterium longum subsp. longum 105-A (JCM 31944) has multiple solute-binding proteins belonging to ATP-binding cassette transporters for sugars. Each strain in the library of 11 B. longum subsp. longum mutants, in which each gene of the solute-binding protein was disrupted, was cultured in a medium containing Gal-β1,4-Rha as the sole carbon source, and only the BL105A_0502 gene-disruption mutant showed delayed and reduced growth compared to the wild-type strain. BL105A_0502 homolog is highly conserved in bifidobacteria. In a Gal-β1,4-Rha-containing medium, Bifidobacterium longum subsp. infantis JCM 1222T, which possesses BLIJ_2090, a homologous protein to BL105A_0502, suppressed the growth of enteric pathogen Clostridioides difficile, whereas the BLIJ_2090 gene-disrupted mutant did not. In vivo, administration of B. infantis and Gal-β1,4-Rha alleviated C. difficile infection-related weight loss in mice. We have successfully screened Gal-β1,4-Rha as a next-generation prebiotic candidate that specifically promotes the growth of beneficial bacteria without promoting the growth of prominent bacteria and pathogens.

    DOI: 10.1080/19490976.2021.1973835

    PubMed

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  • Alkoxycarbonyl elimination of 3-O-substituted glucose and fructose by heat treatment under neutral pH 査読

    Kazuhiro Chiku, Riku Tsukasaki, Yu Teshima, Mitsuru Yoshida, Hiroki Aramasa, Takanori Nihira, Hiroyuki Nakai, Hiroshi Ono, Motomitsu Kitaoka

    Carbohydrate Research   108129 - 108129   2020年8月

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    掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:Elsevier BV  

    DOI: 10.1016/j.carres.2020.108129

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  • Large-scale preparation of β-1,2-glucan using quite a small amount of sophorose 査読

    Kobayashi K., Nakajima M., Aramasa H., Kimura S., Iwata T., Nakai H., Taguchi H.

    Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry   83 ( 10 )   1867 - 1874   2019年10月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1080/09168451.2019.1630257

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  • Identification, characterization, and structural analyses of a fungal endo-β-1,2-glucanase reveal a new glycoside hydrolase family. 査読

    Tanaka N, Nakajima M, Narukawa-Nara M, Matsunaga H, Kamisuki S, Aramasa H, Takahashi Y, Sugimoto N, Abe K, Terada T, Miyanaga A, Yamashita T, Sugawara F, Kamakura T, Komba S, Nakai H, Taguchi H

    The Journal of biological chemistry   294 ( 19 )   7942 - 7965   2019年5月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1074/jbc.RA118.007087

    Web of Science

    PubMed

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  • Colorimetric determination of β-1,2-glucooligosaccharides for an enzymatic assay using 3-methyl-2-benzothiazolinonehydrazone. 査読

    Kobayashi K, Aramasa H, Nakai H, Nakajima M, Taguchi H

    Analytical biochemistry   560   1 - 6   2018年11月

  • Synthesis of three deoxy-sophorose derivatives for evaluating the requirement of hydroxy groups at position 3 and/or 3' of sophorose by 1,2-β-oligoglucan phosphorylases. 査読

    Tanaka N, Nakajima M, Aramasa H, Nakai H, Taguchi H, Tsuzuki W, Komba S

    Carbohydrate research   468   13 - 22   2018年10月

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  • Characterization and Structural Analysis of a Novel exo-Type Enzyme Acting on β-1,2-Glucooligosaccharides from Parabacteroides distasonis. 査読

    Shimizu H, Nakajima M, Miyanaga A, Takahashi Y, Tanaka N, Kobayashi K, Sugimoto N, Nakai H, Taguchi H

    Biochemistry   57 ( 26 )   3849 - 3860   2018年7月

  • A heterozygous mutation in the SAM domain of p63 underlies a mild form of ectodermal dysplasia. 査読 国際誌

    Toru Kawai, Ryota Hayashi, Hiroyuki Nakai, Yutaka Shimomura, Mazen Kurban, Lamiaa Hamie, Hiroki Fujikawa, Atsushi Fujimoto, Riichiro Abe

    Journal of dermatological science   90 ( 3 )   360 - 363   2018年6月

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  • Structural and thermodynamic insights into β-1,2-glucooligosaccharide capture by a solute-binding protein in <i>Listeria innocua</i>. 査読

    Abe K, Sunagawa N, Terada T, Takahashi Y, Arakawa T, Igarashi K, Samejima M, Nakai H, Taguchi H, Nakajima M, Fushinobu S

    The Journal of biological chemistry   293 ( 23 )   8812 - 8828   2018年

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1074/jbc.RA117.001536

    Scopus

    PubMed

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  • Function and structure relationships of a β-1,2-glucooligosaccharide-degrading β-glucosidase. 査読

    Ishiguro R, Tanaka N, Abe K, Nakajima M, Maeda T, Miyanaga A, Takahashi Y, Sugimoto N, Nakai H, Taguchi H

    FEBS letters   591 ( 23 )   3926 - 3936   2017年12月

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  • Biochemical and structural analyses of a bacterial <i>endo</i>-β-1,2-glucanase reveal a new glycoside hydrolase family. 査読

    Abe K, Nakajima M, Yamashita T, Matsunaga H, Kamisuki S, Nihira T, Takahashi Y, Sugimoto N, Miyanaga A, Nakai H, Arakawa T, Fushinobu S, Taguchi H

    The Journal of biological chemistry   292 ( 18 )   7487 - 7506   2017年5月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1074/jbc.M116.762724

    Web of Science

    PubMed

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  • Mechanistic insight into the substrate specificity of 1,2-β-oligoglucan phosphorylase from Lachnoclostridium phytofermentans. 査読

    Nakajima M, Tanaka N, Furukawa N, Nihira T, Kodutsumi Y, Takahashi Y, Sugimoto N, Miyanaga A, Fushinobu S, Taguchi H, Nakai H

    Scientific reports   7   42671   2017年2月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1038/srep42671

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  • Mutations in SDR9C7 gene encoding an enzyme for vitamin A metabolism underlie autosomal recessive congenital ichthyosis 査読

    Yohya Shigehara, Shujiro Okuda, Georges Nemer, Adele Chedraoui, Ryota Hayashi, Fadi Bitar, Hiroyuki Nakai, Ossama Abbas, Laetitia Daou, Riichiro Abe, Maria Bou Sleiman, Abdul Ghani Kibbi, Mazen Kurban, Yutaka Shimomura

    HUMAN MOLECULAR GENETICS   25 ( 20 )   4484 - 4493   2016年10月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1093/hmg/ddw277

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  • Using Carbohydrate Interaction Assays to Reveal Novel Binding Sites in Carbohydrate Active Enzymes 査読

    Darrell Cockburn, Casper Wilkens, Adiphol Dilokpimol, Hiroyuki Nakai, Anna Lewinska, Maher Abou Hachem, Birte Svensson

    PLOS ONE   11 ( 8 )   e0160112   2016年8月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1371/journal.pone.0160112

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  • An efficient arabinoxylan-debranching α-L-arabinofuranosidase of family GH62 from Aspergillus nidulans contains a secondary carbohydrate binding site. 査読

    Wilkens C, Andersen S, Petersen BO, Li A, Busse-Wicher M, Birch J, Cockburn D, Nakai H, Christensen HE, Kragelund BB, Dupree P, McCleary B, Hindsgaul O, Hachem MA, Svensson B

    Applied microbiology and biotechnology   100 ( 14 )   6265 - 6277   2016年7月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1007/s00253-016-7417-8

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  • A Solanum torvum GH3 β-glucosidase expressed in Pichia pastoris catalyzes the hydrolysis of furostanol glycoside. 査読

    Suthangkornkul R, Sriworanun P, Nakai H, Okuyama M, Svasti J, Kimura A, Senapin S, Arthan D

    Phytochemistry   127   4 - 11   2016年7月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1016/j.phytochem.2016.03.015

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  • Purification and characterization of a chloride ion-dependent α-glucosidase from the midgut gland of Japanese scallop (Patinopecten yessoensis). 査読

    Masuda Y, Okuyama M, Iizuka T, Nakai H, Saburi W, Fukukawa T, Maneesan J, Tagami T, Naraoka T, Mori H, Kimura A

    Bioscience, biotechnology, and biochemistry   80 ( 3 )   479 - 485   2016年3月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1080/09168451.2015.1116926

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  • Functional and Structural Analysis of a β-Glucosidase Involved in β-1,2-Glucan Metabolism in Listeria innocua. 査読

    Nakajima M, Yoshida R, Miyanaga A, Abe K, Takahashi Y, Sugimoto N, Toyoizumi H, Nakai H, Kitaoka M, Taguchi H

    PloS one   11 ( 2 )   e0148870   2016年2月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1371/journal.pone.0148870

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  • A tale of two sisters: identical IL36RN mutations and discordant phenotypes 査読

    N. Rajan, N. Sinclair, H. Nakai, Y. Shimomura, S. . Natarajan

    BRITISH JOURNAL OF DERMATOLOGY   174 ( 2 )   417 - 420   2016年2月

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  • Novel splice site mutation in the fumarate hydratase (FH) gene is associated with multiple cutaneous leiomyomas in a Japanese patient 査読

    Yukina Yoshinaga, Hiroyuki Nakai, Ryota Hayashi, Akiko Ito, Naoyuki Kariya, Masaaki Ito, Yutaka Shimomura

    JOURNAL OF DERMATOLOGY   43 ( 1 )   85 - 91   2016年1月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1111/1346-8138.13019

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  • Characterization and crystal structure determination of β-1,2-mannobiose phosphorylase from Listeria innocua. 査読

    Tsuda T, Nihira T, Chiku K, Suzuki E, Arakawa T, Nishimoto M, Kitaoka M, Nakai H, Fushinobu S

    FEBS letters   589 ( 24 )   3816 - 3821   2015年12月

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    担当区分:責任著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1016/j.febslet.2015.11.034

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  • An inverting β-1,2-mannosidase belonging to glycoside hydrolase family 130 from Dyadobacter fermentans. 査読

    Nihira T, Chiku K, Suzuki E, Nishimoto M, Fushinobu S, Kitaoka M, Ohtsubo K, Nakai H

    FEBS letters   589 ( 23 )   3604 - 3610   2015年11月

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    担当区分:最終著者, 責任著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1016/j.febslet.2015.10.008

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  • Analysis of surface binding sites (SBS) within GH62, GH13 and GH77 査読

    Wilkens C, Cockburn D, Andersen S, Petersen BO, Ruzanski C, Field RA, Hindsgaul O, Nakai H, McCleary B, Smith AM, Abou Hachem M, Svensson B

    62 ( 3 )   87 - 93   2015年8月

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    記述言語:英語  

    DOI: 10.5458/jag.jag.JAG-2015_006

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  • Crystal Structure and Substrate Recognition of Cellobionic Acid Phosphorylase, Which Plays a Key Role in Oxidative Cellulose Degradation by Microbes 査読

    Young-Woo Nam, Takanori Nihira, Takatoshi Arakawa, Yuka Saito, Motomitsu Kitaoka, Hiroyuki Nakai, Shinya Fushinobu

    JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY   290 ( 30 )   18281 - 18292   2015年7月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1074/jbc.M115.664664

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  • Large-scale preparation of 1,2-β-glucan using 1,2-β-oligoglucan phosphorylase 査読

    Abe K, Nakajima M, Kitaoka M, Toyoizumi H, Takahashi Y, Sugimoto N, Nakai H, Taguchi H

    Journal of Applied Glycoscience   62 ( 2 )   47 - 52   2015年5月

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    記述言語:英語   出版者・発行元:The Japanese Society of Applied Glycoscience  

    1,2-β-Glucan was produced enzymatically from 1.0 M sucrose and 0.5 M glucose by the combination of sucrose phosphorylase and 1,2-β-oligoglucan phosphorylase in the presence of 100 mM inorganic phosphate. Accumulation of 1,2-β-glucan in 2 L of the reaction mixture reached over 800 mM (glucose equivalent). Sucrose, glucose and fructose were removed after the reaction by yeast treatment. 1,2-β-Glucan was precipitated with ethanol to obtain 167 g of 1,2-β-glucan from 1 L of the reaction mixture.

    DOI: 10.5458/jag.jag.JAG-2014_011

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  • Discovery of two β-1,2-mannoside phosphorylases showing different chain-length specificities from Thermoanaerobacter sp. X-514. 査読

    Chiku K, Nihira T, Suzuki E, Nishimoto M, Kitaoka M, Ohtsubo K, Nakai H

    PloS one   9 ( 12 )   e114882   2014年12月

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    担当区分:最終著者, 責任著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1371/journal.pone.0114882

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  • One pot enzymatic production of nigerose from common sugar resources employing nigerose phosphorylase 査読

    Nihira T, Miyajima F, Nishimoto M, Kitaoka M, Ohtsubo K, Nakai H

    Journal of Applied Glycoscience   61 ( 3 )   75 - 80   2014年8月

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    担当区分:最終著者, 責任著者   記述言語:英語  

    DOI: 10.5458/jag.jag.JAG-2013_012

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  • Structural basis for reversible phosphorolysis and hydrolysis reactions of 2-O-α-glucosylglycerol phosphorylase. 査読

    Touhara KK, Nihira T, Kitaoka M, Nakai H, Fushinobu S

    The Journal of biological chemistry   289 ( 26 )   18067 - 18075   2014年6月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1074/jbc.M114.573212

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  • Characterization of two α-1,3-glucoside phosphorylases from Clostridium phytofermentans 査読

    Nihira T, Nishimoto M, Nakai H, Ohtsubo K, Kitaoka M

    Journal of Applied Glycoscience   61 ( 2 )   59 - 66   2014年5月

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    記述言語:英語  

    DOI: 10.5458/jag.jag.JAG-2013_013

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  • 1,2-β-Oligoglucan phosphorylase from Listeria innocua. 査読

    Nakajima M, Toyoizumi H, Abe K, Nakai H, Taguchi H, Kitaoka M

    PloS one   9 ( 3 )   e92353   2014年3月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1371/journal.pone.0092353

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  • 2-O-α-D-glucosylglycerol phosphorylase from Bacillus selenitireducens MLS10 possessing hydrolytic activity on β-D-glucose 1-phosphate. 査読

    Nihira T, Saito Y, Ohtsubo K, Nakai H, Kitaoka M

    PloS one   9 ( 1 )   e86548   2014年1月

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    担当区分:責任著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1371/journal.pone.0086548

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  • Discovery of cellobionic acid phosphorylase in cellulolytic bacteria and fungi 査読

    Takanori Nihira, Yuka Saito, Mamoru Nishimoto, Motomitsu Kitaoka, Kiyohiko Igarashi, Ken'Ichi Ohtsubo, Hiroyuki Nakai

    FEBS Letters   587 ( 21 )   3556 - 3561   2013年11月

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    担当区分:最終著者, 責任著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1016/j.febslet.2013.09.014

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  • Potassium ion-dependent trehalose phosphorylase from halophilic Bacillus selenitireducens MLS10 査読

    Takanori Nihira, Yuka Saito, Kazuhiro Chiku, Motomitsu Kitaoka, Ken'ichi Ohtsubo, Hiroyuki Nakai

    FEBS LETTERS   587 ( 21 )   3382 - 3386   2013年11月

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    担当区分:最終著者, 責任著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1016/j.febslet.2013.08.038

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  • Characterization of a novel missense mutation in the prodomain of GDF5, which underlies brachydactyly type C and mild Grebe type chondrodysplasia in a large Pakistani family 査読

    Muhammad Farooq, Hiroyuki Nakai, Atsushi Fujimoto, Hiroki Fujikawa, Klaus Wilbrandt Kjaer, Shahid Mahmood Baig, Yutaka Shimomura

    HUMAN GENETICS   132 ( 11 )   1253 - 1264   2013年11月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1007/s00439-013-1330-3

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  • Discovery of β-1,4-D-mannosyl-N-acetyl-D-glucosamine phosphorylase involved in the metabolism of N-glycans. 査読

    Nihira T, Suzuki E, Kitaoka M, Nishimoto M, Ohtsubo K, Nakai H

    The Journal of biological chemistry   288 ( 38 )   27366 - 27374   2013年9月

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    担当区分:最終著者, 責任著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1074/jbc.M113.469080

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  • A snapshot into the metabolism of isomalto-oligosaccharides in probiotic bacteria 査読

    Abou Hachem M, Møller MS, Andersen JM, Fredslund F, Majumder A, Nakai H, Leggio LL, Goh YJ, Barrangou R, Klaenhammer TR, Svensson B

    Journal of Applied Glycoscience   60 ( 2 )   95 - 100   2013年7月

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    記述言語:英語   出版者・発行元:The Japanese Society of Applied Glycoscience  

    <i>In vitro</i> and <i>in vivo</i> studies have demonstrated the prebiotic potential of isomalto-oligosaccharides (IMO), comprising α-(1,6)-gluco-oligosaccharides and panose, which selectively stimulate the growth of probiotic bifidobacteria and lactobacilli. The protein machinery conferring the utilization of IMO by probiotics, however, remains vaguely described. We have used genomic, transcriptomic, enzymatic, and biophysical analyses to explore IMO utilization routes in probiotic lactobacilli and bifidobacteria as re­presented by <i>Lactobacillus acidophilus</i> NCFM and <i>Bifidobacterium animalis</i> subsp. <i>lactis</i> Bl-04, respectively. Utilization of IMO and malto-oligosaccharide (α-(1,4)-glucosides) appears to be linked both at the genetic and transcriptomic level in the acidophilus group lactobacilli as suggested by reverse transcriptase PCR (RT-PCR) and gene landscape analysis. Canonical intracellular GH13_31 glucan 1,6-α-glucosidases active on IMO longer than isomaltose occur widely in acidophilus group lactobacilli. Interestingly, however, isomaltose, isomaltulose and panose seem to be internalized through a phosphoenoyl pyruvate transferase system (PTS) and subsequently hydrolyzed by a GH4 6-phosphate-α-glucosidases based on whole genome microarray analysis. This sub-specificity within GH4 seems to be unique for lactobacilli mainly from the gut niche, as the sequences from this group segregate from characterized GH4 maltose-6-phosphate-α-glucosidases in other organisms. By comparison, IMO utilization in bifidobacteria is linked to soybean oligosaccharide utilization loci harboring GH36 α-galactosidases, GH13_31 oligo 1,6-α-glucosidases and a dual specificity ATP-binding cassette (ABC) transport system active in the uptake of both classes of α-(1,6)-glycosides. These data bring novel insight to advance our understanding of the basis of selectivity of IMO metabolism by important gut microbiome members.

    DOI: 10.5458/jag.jag.JAG-2012_022

    CiNii Article

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  • Colorimetric quantification of α-D-mannose 1-phosphate 査読

    Nihira T, Suzuki E, Kitaoka M, Nishimoto M, Ohtsubo K, Nakai H

    Journal of Applied Glycoscience   60 ( 2 )   137 - 139   2013年7月

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    担当区分:最終著者, 責任著者   記述言語:英語   出版者・発行元:The Japanese Society of Applied Glycoscience  

    We developed an enzymatic colorimetric method for the quantification of <i>α</i>-D-mannose 1-phosphate by adding phosphomannomutase, mannose 6-phosphate isomerase and glucose 6-phosphate isomerase to a conventional glucose 6-phosphate assay using glucose 6-phosphate dehydrogenase. In this method, <i>α</i>-D-mannose 1-phosphate is converted into D-glucose 6-phosphate <i>via </i>D-mannose 6-phosphate and D-fructose 6-phosphate and the resultant D-glucose 6-phosphate is ultimately converted into 6-phosphogluconolactone under concomitant reduction of thio-NAD<sup>+</sup> to thio-NADH, which can be quantified by its wavelength of 400 nm. This method is not altered by the presence of D-mannose, D-mannosamine, <i>N</i>-acetyl-D-mannosamine, L-mannose, <i>β</i>-1,4-mannobiose, <i>α</i>-1,2-mannobiose, methyl <i>α</i>-D-mannoside or dimethyl sulfoxide and it would be useful in studies involving enzymes such as phosphorylases belonging to glycoside hydrolase family 130, which release <i>α</i>-D-mannose 1-phosphate as the reaction product.

    DOI: 10.5458/jag.jag.JAG-2012_019

    CiNii Article

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  • In vitro growth of four individual human gut bacteria on oligosaccharides produced by chemoenzymatic synthesis 査読

    Louise K. Vigsnaes, Hiroyuki Nakai, Lene Hemmingsen, Joakim M. Andersen, Sampo J. Lahtinen, Louise E. Rasmussen, Maher Abou Hachem, Bent O. Petersen, Jens Ø. Duus, Anne S. Meyer, Tine R. Licht, Birte Svensson

    Food and Function   4 ( 5 )   784 - 793   2013年5月

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    担当区分:筆頭著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1039/c3fo30357h

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  • Recent development of phosphorylases possessing large potential for oligosaccharide synthesis 査読

    Hiroyuki Nakai, Motomitsu Kitaoka, Birte Svensson, Ken'ichi Ohtsubo

    CURRENT OPINION IN CHEMICAL BIOLOGY   17 ( 2 )   301 - 309   2013年4月

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    担当区分:筆頭著者, 責任著者   記述言語:英語  

    DOI: 10.1016/j.cbpa.2013.01.006

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  • Key aromatic residues at subsites +2 and +3 of glycoside hydrolase family 31 alpha-glucosidase contribute to recognition of long-chain substrates 査読

    Takayoshi Tagami, Masayuki Okuyama, Hiroyuki Nakai, Young-Min Kim, Haruhide Mori, Kazunori Taguchi, Birte Svensson, Atsuo Kimura

    BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA-PROTEINS AND PROTEOMICS   1834 ( 1 )   329 - 335   2013年1月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1016/j.bbapap.2012.08.007

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  • Mutation Analysis of the IL36RN Gene in 14 Japanese Patients with Generalized Pustular Psoriasis 査読

    Muhammad Farooq, Hiroyuki Nakai, Atsushi Fujimoto, Hiroki Fujikawa, Asako Matsuyama, Naoyuki Kariya, Atsuko Aizawa, Hiroshi Fujiwara, Masaaki Ito, Yutaka Shimomura

    HUMAN MUTATION   34 ( 1 )   176 - 183   2013年1月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1002/humu.22203

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  • Key aromatic residues at subsites +2 and +3 of glycoside hydrolase family 31 α-glucosidase contribute to recognition of long-chain substrates. 査読

    Tagami T, Okuyama M, Nakai H, Kim YM, Mori H, Taguchi K, Svensson B, Kimura A

    Biochimica et biophysica acta   1834 ( 1 )   329 - 335   2013年1月

  • Characterization of a laminaribiose phosphorylase from Acholeplasma laidlawii PG-8A and production of 1,3-β-D-glucosyl disaccharides. 査読

    Nihira T, Saito Y, Kitaoka M, Nishimoto M, Otsubo K, Nakai H

    Carbohydrate research   361   49 - 54   2012年11月

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    担当区分:最終著者, 責任著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1016/j.carres.2012.08.006

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  • Identification of Bacillus selenitireducens MLS10 maltose phosphorylase possessing synthetic ability for branched α-D-glucosyl trisaccharides. 査読

    Nihira T, Saito Y, Kitaoka M, Otsubo K, Nakai H

    Carbohydrate research   360   25 - 30   2012年10月

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    担当区分:最終著者, 責任著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1016/j.carres.2012.07.014

    Web of Science

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  • Amino acids in conserved region II are crucial to substrate specificity, reaction velocity, and regioselectivity in the transglucosylation of honeybee GH-13 α-glucosidases. 査読

    Ngiwsara L, Iwai G, Tagami T, Sato N, Nakai H, Okuyama M, Mori H, Kimura A

    Bioscience, biotechnology, and biochemistry   76 ( 10 )   1967 - 1974   2012年10月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1271/bbb.120473

    Web of Science

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  • Bacteroides thetaiotaomicron VPI-5482 glycoside hydrolase family 66 homolog catalyzes dextranolytic and cyclization reactions 査読

    Young-Min Kim, Eiji Yamamoto, Min-Sun Kang, Hiroyuki Nakai, Wataru Saburi, Masayuki Okuyama, Haruhide Mori, Kazumi Funane, Mitsuru Momma, Zui Fujimoto, Mikihiko Kobayashi, Doman Kim, Atsuo Kimura

    FEBS JOURNAL   279 ( 17 )   3185 - 3191   2012年9月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1111/j.1742-4658.2012.08698.x

    Web of Science

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  • Enzymology and structure of the GH13_31 glucan 1,6-α-glucosidase that confers isomaltooligosaccharide utilization in the probiotic Lactobacillus acidophilus NCFM. 査読

    Møller MS, Fredslund F, Majumder A, Nakai H, Poulsen JC, Lo Leggio L, Svensson B, Abou Hachem M

    Journal of bacteriology   194 ( 16 )   4249 - 4259   2012年8月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1128/JB.00622-12

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  • Novel Dextranase Catalyzing Cycloisomaltooligosaccharide Formation and Identification of Catalytic Amino Acids and Their Functions Using Chemical Rescue Approach 査読

    Young-Min Kim, Yoshiaki Kiso, Tomoe Muraki, Min-Sun Kang, Hiroyuki Nakai, Wataru Saburi, Weeranuch Lang, Hee-Kwon Kang, Masayuki Okuyama, Haruhide Mori, Ryuichiro Suzuki, Kazumi Funane, Nobuhiro Suzuki, Mitsuru Momma, Zui Fujimoto, Tetsuya Oguma, Mikihiko Kobayashi, Doman Kim, Atsuo Kimura

    JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY   287 ( 24 )   19927 - 19935   2012年6月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1074/jbc.M111.339036

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  • A novel metabolic pathway for glucose production mediated by α-glucosidase-catalyzed conversion of 1,5-anhydrofructose. 査読

    Kim YM, Saburi W, Yu S, Nakai H, Maneesan J, Kang MS, Chiba S, Kim D, Okuyama M, Mori H, Kimura A

    The Journal of biological chemistry   287 ( 27 )   22441 - 22444   2012年6月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1074/jbc.C112.360909

    Web of Science

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  • 3-O-α-D-glucopyranosyl-L-rhamnose phosphorylase from Clostridium phytofermentans. 査読

    Nihira T, Nakai H, Kitaoka M

    Carbohydrate research   350   94 - 97   2012年3月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1016/j.carres.2011.12.019

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  • Discovery of nigerose phosphorylase from Clostridium phytofermentans 査読

    Takanori Nihira, Hiroyuki Nakai, Kazuhiro Chiku, Motomitsu Kitaoka

    APPLIED MICROBIOLOGY AND BIOTECHNOLOGY   93 ( 4 )   1513 - 1522   2012年2月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1007/s00253-011-3515-9

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  • Recombinant production and characterisation of two related GH5 endo-beta-1,4-mannanases from Aspergillus nidulans FGSC A4 showing distinctly different transglycosylation capacity 査読

    Adiphol Dilokpimol, Hiroyuki Nakai, Charlotte H. Gotfredsen, Martin J. Baumann, Natsuko Nakai, Maher Abou Hachem, Birte Svensson

    BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA-PROTEINS AND PROTEOMICS   1814 ( 12 )   1720 - 1729   2011年12月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1016/j.bbapap.2011.08.003

    Web of Science

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  • Recombinant production and characterisation of two related GH5 endo-β-1,4-mannanases from Aspergillus nidulans FGSC A4 showing distinctly different transglycosylation capacity. 査読

    Dilokpimol A, Nakai H, Gotfredsen CH, Baumann MJ, Nakai N, Abou Hachem M, Svensson B

    Biochimica et biophysica acta   1814 ( 12 )   1720 - 1729   2011年12月

  • An enzymatic colorimetric quantification of orthophosphate 査読

    Li B, Nihira T, Nakai H, Nishimoto M, Kitaoka M

    Journal of Applied Glycoscience   58 ( 3 )   125 - 127   2011年9月

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    記述言語:英語   出版者・発行元:The Japanese Society of Applied Glycoscience  

    Quantification of orthophosphate (Pi) in the presence of labile phosphate esters is required for biochemical assays. We developed a method for the enzymatic colorimetric quantification of Pi using pyruvate oxidase and peroxidase. The calibration curve was not affected by the presence of labile phosphate esters. Furthermore, this method allows continuous monitoring of the reaction of Pi-releasing enzymes.

    DOI: 10.5458/jag.jag.JAG-2011_002

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  • Truncation of N- and C-terminal regions of Streptococcus mutans dextranase enhances catalytic activity 査読

    Young-Min Kim, Ryoko Shimizu, Hiroyuki Nakai, Haruhide Mori, Masayuki Okuyama, Min-Sun Kang, Zui Fujimoto, Kazumi Funane, Doman Kim, Atsuo Kimura

    APPLIED MICROBIOLOGY AND BIOTECHNOLOGY   91 ( 2 )   329 - 339   2011年7月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1007/s00253-011-3201-y

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  • Starch-binding domains in the CBM45 family--low-affinity domains from glucan, water dikinase and α-amylase involved in plastidial starch metabolism. 査読

    Glaring MA, Baumann MJ, Abou Hachem M, Nakai H, Nakai N, Santelia D, Sigurskjold BW, Zeeman SC, Blennow A, Svensson B

    The FEBS journal   278 ( 7 )   1175 - 1185   2011年4月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1111/j.1742-4658.2011.08043.x

    Web of Science

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  • Enzymatic synthesis of β-xylosyl-oligosaccharides by transxylosylation using two β-xylosidases of glycoside hydrolase family 3 from Aspergillus nidulans FGSC A4. 査読

    Dilokpimol A, Nakai H, Gotfredsen CH, Appeldoorn M, Baumann MJ, Nakai N, Schols HA, Hachem MA, Svensson B

    Carbohydrate research   346 ( 3 )   421 - 429   2011年2月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1016/j.carres.2010.12.010

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  • Efficient chemoenzymatic oligosaccharide synthesis by reverse phosphorolysis using cellobiose phosphorylase and cellodextrin phosphorylase from Clostridium thermocellum 査読

    Hiroyuki Nakai, Maher Abou Hachem, Bent O. Petersen, Yvonne Westphal, Karin Mannerstedt, Martin J. Baumann, Adiphol Dilokpimol, Henk A. Schols, Jens O. Duus, Birte Svensson

    BIOCHIMIE   92 ( 12 )   1818 - 1826   2010年12月

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    担当区分:筆頭著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1016/j.biochi.2010.07.013

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  • Suicide substrate-based inactivation of endodextranase by ω-epoxyalkyl α-glucopyranosides 査読

    Kang HK, Kim YM, Nakai H, Kang MS, Hakamada W, Okuyama M, Mori H, Nishio T, Kimura A

    Journal of Applied Glycoscience   57 ( 4 )   269 - 272   2010年11月

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    記述言語:英語   出版者・発行元:日本応用糖質科学会  

    <i>Streptococcus mutans</i> ATCC 25175由来のエンド型デキストラナーゼ(SmDex)に対し,3種類のω-エポキシアルキルα-<small>D</small>-グルコピラノシド(3′,4′-エポキシブチルα-<small>D</small>-グルコピラノシド(E4G),4′,5′-エポキシペンチルα-<small>D</small>-グルコピラノシド(E5G)および5′,6′-エポキシヘキシルα-<small>D</small>-グルコピラノシド(E6G):アグリコンのアルキル鎖長が異なる)を作用させると,SmDexは擬一次的な活性低下を示した.アルキル鎖長に依存した失活が認められ,失活の度合いはE5G > E6G > E4Gであった.したがってω-エポキシアルキルα-<small>D</small>-グルコピラノシドのグルコース残基とエポキシ基の距離が,SmDexの失活に対し重要であることが判明した.E5Gは可逆的な中間体を形成する失活機構(自殺基質型の失活機構)を与え,不活性化の一次定数(<i>k</i>)と中間体の解離定数(<i>K</i><small>R</small>)はそれぞれ0.44 min<sup>-1</sup>および1.45 m<small>M</small>と算出された.SmDexの加水分解反応の生成物であるイソマルトースの存在によりE5Gの失活が防御されたため,E5GはSmDexの触媒部位に結合すると示唆された.本論文は,ω-エポキシアルキルα-<small>D</small>-グルコピラノシドがエンド型デキストラナーゼの自殺基質になることを示す初めての報告である.

    DOI: 10.5458/jag.57.269

    CiNii Article

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  • Rational engineering of Lactobacillus acidophilus NCFM maltose phosphorylase into either trehalose or kojibiose dual specificity phosphorylase 査読

    Hiroyuki Nakai, Bent O. Petersen, Yvonne Westphal, Adiphol Dilokpimol, Maher Abou Hachem, Jens O. Duus, Henk A. Schols, Birte Svensson

    PROTEIN ENGINEERING DESIGN & SELECTION   23 ( 10 )   781 - 787   2010年10月

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    担当区分:筆頭著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1093/protein/gzq055

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  • Aspergillus nidulans alpha-galactosidase of glycoside hydrolase family 36 catalyses the formation of alpha-galacto-oligosaccharides by transglycosylation 査読

    Hiroyuki Nakai, Martin J. Baumann, Bent O. Petersen, Yvonne Westphal, Maher Abou Hachem, Adiphol Dilokpimol, Jens O. Duus, Henk A. Schols, Birte Svensson

    FEBS JOURNAL   277 ( 17 )   3538 - 3551   2010年9月

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    担当区分:筆頭著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1111/j.1742-4658.2010.07763.x

    Web of Science

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  • Efficient one-pot enzymatic synthesis of alpha-(1,4)-glucosidic disaccharides through a coupled reaction catalysed by Lactobacillus acidophilus NCFM maltose phosphorylase 査読

    Hiroyuki Nakai, Adiphol Dilokpimol, Maher Abou Hachem, Birte Svensson

    CARBOHYDRATE RESEARCH   345 ( 8 )   1061 - 1064   2010年5月

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    担当区分:筆頭著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1016/j.carres.2010.03.021

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  • The maltodextrin transport system and metabolism in Lactobacillus acidophilus NCFM and production of novel alpha-glucosides through reverse phosphorolysis by maltose phosphorylase 査読

    Hiroyuki Nakai, Martin J. Baumann, Bent O. Petersen, Yvonne Westphal, Henk Schols, Adiphol Dilokpimol, Maher A. Hachem, Sampo J. Lahtinen, Jens O. Duus, Birte Svensson

    FEBS JOURNAL   276 ( 24 )   7353 - 7365   2009年12月

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    担当区分:筆頭著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1111/j.1742-4658.2009.07445.x

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  • Molecular Mechanism of α-glucosidase 査読

    Masayuki Okuyama, Haruhide Mori, Hironori Hondoh, Hiroyuki Nakai, Wataru Saburi, Min Sung Kang, Young Min Kim, Mamoru Nishimoto, Jintanart Wongchawalit, Takeshi Yamamoto, Mee Son, Jin Ha Lee, San San Mar, Kenji Fukuda, Seiya Chiba, Atsuo Kimura

    Carbohydrate-Active Enzymes: Structure, Function and Applications   64 - 76   2008年9月

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    掲載種別:論文集(書籍)内論文  

    DOI: 10.1533/9781845695750.1.64

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  • Rice α-glucosidase isozymes and isoforms showing different starch granules-binding and -degrading ability 査読

    Nakai H, Tanizawa S, Ito T, Kamiya K, Kim YM, Yamamoto T, Matsubara K, Sakai M, Sato H, Imbe T, Okuyama M, Mori H, Chiba S, Sano Y, Kimura A

    Biocatalysis and Biotransformation   26 ( 1-2 )   104 - 110   2008年

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    担当区分:筆頭著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1080/10242420701788736

    Web of Science

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  • Function-unknown glycoside hydrolase family 31 proteins, mRNAs of which were expressed in rice ripening and germinating stages, are alpha-glucosidase and alpha-xylosidase 査読

    Hiroyuki Nakai, Shigeki Tanizawa, Tatsuya Ito, Koutarou Kamiya, Young-Min Kim, Takeshi Yamamoto, Kazuki Matsubara, Makoto Sakai, Hiroyuki Sato, Tokio Imbe, Masayuki Okuyama, Haruhide Mori, Yoshio Sano, Seiya Chiba, Atsuo Kimura

    JOURNAL OF BIOCHEMISTRY   142 ( 4 )   491 - 500   2007年10月

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    担当区分:筆頭著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1093/jb/mvm174

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  • Multiple forms of alpha-glucosidase in rice seeds (Oryza sativa L., var Nipponbare) 査読

    Hiroyuki Nakai, Tatsuya Ito, Masatoshi Hayashi, Koutarou Kamiya, Takeshi Yamamoto, Kazuki Matsubara, Young-Min Kim, Wongchawalit Jintanart, Masayuki Okuyama, Haruhide Mori, Seiya Chiba, Yoshio Sano, Atsuo Kimura

    BIOCHIMIE   89 ( 1 )   49 - 62   2007年1月

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    担当区分:筆頭著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1016/j.biochi.2006.09.014

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  • Purification and characterization of alpha-glucosidase I from Japanese honeybee (Apis cerana japonica) and molecular cloning of its cDNA 査読

    Jintanart Wongchawalit, Takeshi Yamamoto, Hiroyuki Nakai, Young-Min Kim, Natsuko Sato, Mamoru Nishimoto, Masayuki Okuyama, Haruhide Mori, Osamu Saji, Chanpen Chanchao, Siriwat Wongsiri, Rudee Surarit, Jisnuson Svasti, Seiya Chiba, Atsuo Kimura

    BIOSCIENCE BIOTECHNOLOGY AND BIOCHEMISTRY   70 ( 12 )   2889 - 2898   2006年12月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1271/bbb.60302

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  • Plant α-glucosidase: Molecular analysis of rice α-glucosidase and degradation mechanism of starch granules in germination stage 査読

    Nakai H, Ito T, Tanizawa S, Matsubara K, Yamamoto T, Okuyama M, Mori H, Chiba S, Sano Y, Kimura A

    Journal of Applied Glycoscience   53 ( 2 )   137 - 142   2006年7月

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    担当区分:筆頭著者   記述言語:英語   出版者・発行元:The Japanese Society of Applied Glycoscience  

    植物種子が発芽する際に貯蔵物質である澱粉は,各種加水分解酵素により酵素分解され,生長に必要な物質・エネルギーの供給源となる.澱粉は植物種子中に不溶性の澱粉粒として存在するため,現在までα-アミラーゼが唯一澱粉粒に直接作用できる酵素であると考えられてきた.しかし,我々は植物α-グルコシダーゼが澱粉粒への吸着・分解能をもつことを明らかにし,第2の澱粉分解経路 (澱粉粒にα-グルコシダーゼが作用し,直接グルコースを遊離する経路) の存在を示した.さらに,植物α-グルコシダーゼには,触媒ドメインとは独立して機能する澱粉粒吸着ドメインがC末端に存在することを解明した.本ドメインに保存された芳香族アミノ酸に対する部位特異的変異導入により,澱粉粒吸着に関与する残基を推定した.植物種子中には,複数のα-グルコシダーゼが存在する.我々は,イネ種子中に可溶性および不溶性 (界面活性剤により可溶化が可能) の性質を示す2種のアイソザイムを見出した.両酵素の発現様式から,14品種のイネ種子を二つのグループ (グループ1,2) に大別した.グループ1は,不溶性酵素のみが乾燥種子に検出されるイネ品種である.不溶性α-グルコシダーゼが登熟期で合成され,完熟に伴い種子中に保存されるが,発芽の進行につれ消失する.発芽後に可溶性酵素が新たに合成される.グループ2の品種では,可溶性および不溶性の酵素が乾燥種子に検出された.両酵素は登熟期で合成され,発芽期間中の活性は変化せず,一定のレベルで推移する.グループ1からは赤米を,グループ2では日本晴を実験対象に選び,α-グルコシダーゼの機能解析を行った.翻訳後修飾やゲノム遺伝子発現調節によるアイソフォームやアイソザイムの形成機構ならびに精製酵素を用いた性質の解明を行った.多様なα-グルコシダーゼが関与する澱粉代謝の一端が明らかにされた.N末領域に生じる翻訳後限定分解は,植物酵素に対し一般的に観察される現象であった.

    DOI: 10.5458/jag.53.137

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  • Glucoamylase originating from Schwanniomyces occidentalis is a typical alpha-glucosidase 査読

    F Sato, M Okuyama, H Nakai, H Mori, A Kimura, S Chiba

    BIOSCIENCE BIOTECHNOLOGY AND BIOCHEMISTRY   69 ( 10 )   1905 - 1913   2005年10月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1271/bbb.69.1905

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  • Enzymatic synthesis of alkyl α-2-deoxylglucosides by alkyl alcohol resistant α-glucosidase from Aspergillus niger 査読

    Kim YM, Okuyama M, Mori H, Nakai H, Saburi W, Chiba S, Kimura A

    Tetrahedron Asymmetry   16 ( 2 )   403 - 409   2005年1月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1016/j.tetasy.2004.11.046

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  • Molecular analysis of α-glucosidase belonging to GH-family 31 査読

    Nakai H, Okuyama M, Kim YM, Saburi W, Wongchawalit J, Mori H, Chiba S, Kimura A

    Biologia, Bratislava   60   131 - 135   2005年

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    担当区分:筆頭著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

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MISC

  • 直鎖β-1,2-グルカンから環状16+2(18)糖を特異的に合成する光合成細菌由来GH186ホモログの機能構造相関の解明

    丹生拳志郎, 元内省, 今場司朗, キム インヒョク, 鹿島騰真, 北野義直, 中井博之, 中島将博

    日本応用糖質科学会大会・応用糖質科学シンポジウム講演要旨集   74th-14th   2025年

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  • 青枯病菌と水稲根圏細菌が作る機能未知糖鎖α-1,6-cyclizedβ-1,2-glucanの合成酵素の機能と構造

    KIM Inhyuk, 元内省, 今場司朗, 鹿島騰真, 北野義直, 中井博之, 中島将博

    日本農芸化学会大会講演要旨集(Web)   2025   2025年

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  • 新規α-1,6-環状化-β-1,2-グルコ21糖・29糖合成酵素の発見と機能構造解析

    石黒亜衣, 元内省, キム インヒョク, 今場司朗, 鹿島騰真, 北野義直, 中井博之, 中島将博

    日本応用糖質科学会大会・応用糖質科学シンポジウム講演要旨集   74th-14th   2025年

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  • モデル光合成細菌Cereibacter sphaeroides由来の新規transglycosylaseは「植物病原性糖鎖様の」環状糖を合成する

    丹生拳志郎, 元内省, 今場司朗, 鹿島騰真, KIM Inhyuk, 北野義直, 中井博之, 中島将博

    日本農芸化学会大会講演要旨集(Web)   2025   2025年

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  • α-1,6-Cyclized β-1,2-glucanを基本骨格とする多様な新規糖鎖の発見とその合成酵素群の機能解明

    キム インヒョク, 元内省, 今場司朗, 鹿島騰真, 北野義直, 中井博之, 中島将博

    日本応用糖質科学会大会・応用糖質科学シンポジウム講演要旨集   74th-14th   2025年

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  • 多様化するGH186の反応機構の中で見つかった世界初のanomer-inverting transglycosylation

    元内省, 今場司朗, 小林海渡, 中井博之, 中島将博

    日本応用糖質科学会大会・応用糖質科学シンポジウム講演要旨集   73rd-13th   2024年

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  • ビフィズス菌を選択的に増殖させるガラクトシル-β-1,4-ラムノースを用いた偽膜性腸炎原因菌の生育抑制効果

    平野里佳, 平野里佳, 阪中幹祥, 吉見一人, 吉見一人, 山内祐子, 山内祐子, 後藤愛那, 片山高嶺, 片山高嶺, 飯田宗穂, 加藤完, 大野博司, 吹谷智, 横田篤, 西本完, 北岡本光, 北岡本光, 中井博之, 栗原新, 栗原新

    日本実験動物学会総会講演要旨集(Web)   70th   2023年

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  • ビフィズス菌を特異的に増殖させる次世代型プレバイオティクスの開発と応用

    平野里佳, 阪中幹祥, 杉本直久, 江口省吾, 奈良未沙希, 片山高嶺, 北岡本光, 中井博之, 栗原新

    日本乳酸菌学会誌   30 ( 2 )   2019年

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  • 酵素合成法による機能性オリゴ糖の創出

    中井博之

    応用糖質科学   8 ( 1 )   51‐55   2018年2月

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    記述言語:日本語  

    J-GLOBAL

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  • Ten years of CAZypedia: a living encyclopedia of carbohydrate-active enzymes

    Wade Abbott, Orly Alber, Ed Bayer, Jean-Guy Berrin, Alisdair Boraston, Harry Brumer, Ryszard Brzezinski, Anthony Clarke, Beatrice Cobucci-Ponzano, Darrell Cockburn, Pedro Coutinho, Mirjam Czjzek, Bareket Dassa, Gideon John Davies, Vincent Eijsink, Jens Eklof, Alfons Felice, Elizabeth Ficko-Blean, Geoff Pincher, Thierry Fontaine, Zui Fujimoto, Kiyotaka Fujita, Shinya Fushinobu, Harry Gilbert, Tracey Gloster, Ethan Goddard-Borger, Ian Greig, Jan-Hendrik Hehemann, Glyn Hemsworth, Bernard Henrissat, Masafumi Hidaka, Ramon Hurtado-Guerrero, Kiyohiko Igarashi, Takuya Ishida, Stefan Janecek, Seino Jongkees, Nathalie Juge, Satoshi Kaneko, Takane Katayama, Motomitsu Kitaoka, Naotake Konno, Daniel Kracher, Anna Kulminskaya, Alicia Lammerts van Bueren, Sine Larsen, Junho Lee, Markus Linder, Leila LoLeggio, Roland Ludwig, Ana Luis, Mirko Maksimainen, Brian Mark, Richard McLean, Gurvan Michel, Gurvan Michel, Cedric Montanier, Marco Moracci, Haruhide Mori, Hiroyuki Nakai, Wim Nerinckx, Takayuki Ohnuma, Richard Pickersgill, Kathleen Piens, Tirso Pons, Etienne Rebuffet, Peter Reilly, Magali Remaud-Simeon, Brian Rempel, Kyle Robinson, David Rose, Juha Rouvinen, Wataru Saburi, Yuichi Sakamoto, Mats Sandgren, Fathima Shaikh, Yuval Shoham, Franz St John, Jerry Stahlberg, Michael Suits, Gerlind Sulzenbacher, Tomomi Sumida, Ryuichiro Suzuki, Birte Svensson, Toki Taira, Ed Taylor, Takashi Tonozuka, Breeanna Urbanowicz, Gustav Vaaje-Kolstad, Wim Van den Ende, Annabelle Varrot, Maxime Versluys, Florence Vincent, David Vocadlo, Warren Wakarchuk, Tom Wennekes, Rohan Williams, Spencer Williams, David Wilson, Stephen Withers, Katsuro Yaoi, Vivian Yip, Ran Zhang

    GLYCOBIOLOGY   28 ( 1 )   3 - 8   2018年1月

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  • Listeria innocua由来β‐グルコシダーゼの結晶構造解析

    中島将博, 吉田龍太, 宮永顕正, 中井博之, 田口速男

    KEK Progress Report (Web)   ( 2016-8 )   ROMBUNNO.283 (WEB ONLY)   2017年1月

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    記述言語:日本語  

    J-GLOBAL

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  • Lachnoclostridium phytofermentans由来1,2-β-オリゴグルカンホスホリラーゼの結晶構造解析

    中島将博, 古川那由太, 宮永顕正, 中井博之, 田口速男

    Photon Factory Activity Report   35   2017年

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    記述言語:日本語  

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  • β-1,2-グルカン関連酵素群の機能と構造

    中島将博, 阿部紘一, 阿部紘一, 田中信清, 宮永顕正, 中井博之, 伏信進矢, 五十嵐圭日子, 北岡本光, 鮫島正浩, 田口速男

    応用糖質科学   7 ( 3 )   2017年

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  • Trichoderma reesei由来β‐グルコシダーゼII(Cel1A)の糖転移生成物の解析

    戸谷一英, 二階堂望, 佐野孝晃, 小野寺一樹, 尾形慎, 中島将博, 中井博之

    応用糖質科学   6 ( 3 )   56 - 56   2016年8月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:(一社)日本応用糖質科学会  

    J-GLOBAL

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  • ABCトランスポーターソホロオリゴ糖結合タンパク質のリガンド認識の構造基盤

    阿部 紘一, 中島 将博, 砂川 直輝, 石田 卓也, 五十嵐 圭日子, 鮫島 正浩, 宮永 顕正, 中井 博之, 田口 速男, 荒川 孝俊, 伏信 進矢

    応用糖質科学   6 ( 3 )   62 - 62   2016年8月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:(一社)日本応用糖質科学会  

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  • ソホロオリゴ糖に特異的なABCトランスポーター基質結合タンパク質の熱力学的解析と立体構造

    阿部紘一, 中島将博, 砂川直輝, 石田卓也, 五十嵐圭日子, 鮫島正浩, 宮永顕正, 中井博之, 田口速男, 荒川孝俊, 伏信進矢

    量子ビームサイエンスフェスタ(Web)   2015   2016年

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  • 酸化的セルロース分解に関与するセロビオン酸ホスホリラーゼ

    仁平高則, 杉本直久, 中井博之

    Cellul Commun   22 ( 4 )   175 - 179   2015年12月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:セルロース学会  

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  • 新規β‐マンノシドホスホリラーゼの発見

    知久和寛, 仁平高則, 鈴木絵里香, 西本完, 北岡本光, 中井博之, 大坪研一

    応用糖質科学   5 ( 2 )   120 - 127   2015年5月

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    記述言語:日本語  

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  • Trichoderma reesei由来β‐グルコシダーゼの基質特異性

    佐藤大輔, 平沢巽, 岡田宏文, 尾形慎, 中島将博, 中井博之, 戸谷一英

    日本農芸化学会大会講演要旨集(Web)   2015   3E32A14 (WEB ONLY)   2015年3月

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    記述言語:日本語  

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  • Trichoderma reesei由来のβ‐グルコシダーゼの基質特異性

    戸谷一英, 平沢巽, 鈴木尊久, 尾形慎, 中島将博, 中井博之, 岡田宏文

    応用糖質科学   4 ( 3 )   (53)   2014年8月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:日本応用糖質科学会  

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  • Cp-8 Talaromyces funiculosus由来1,2-β-グルカン分解酵素の遺伝子同定及び機能解析(ホスホリラーゼ,一般講演,日本応用糖質科学会平成26年度大会(第63回))

    田中 信清, 阿部 紘一, 中島 将博, 成川 恵, 北岡 本光, 中井 博之, 山下 哲郎, 田口 速男

    応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌   4 ( 3 )   B50   2014年8月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:日本応用糖質科学会  

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  • Cp-6 Listeria innocua由来β-グルコシダーゼの機能構造相関(ホスホリラーゼ,一般講演,日本応用糖質科学会平成26年度大会(第63回))

    吉田 龍太, 中島 将博, 宮永 顕正, 中井 博之, 北岡 本光, 田口 速男

    応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌   4 ( 3 )   B49   2014年8月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:日本応用糖質科学会  

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  • Cp-14 GH94セロビオン酸ホスホリラーゼの基質特異性の構造基盤(ホスホリラーゼ,一般講演,日本応用糖質科学会平成26年度大会(第63回))

    Nam Young-Woo, 仁平 高則, 北岡 本光, 中井 博之, 荒川 孝俊, 伏信 進矢

    応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌   4 ( 3 )   B51   2014年8月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:日本応用糖質科学会  

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  • Cp-12 GH130に属する糖質加水分解酵素β-1,2-マンノシダーゼの発見(ホスホリラーゼ,一般講演,日本応用糖質科学会平成26年度大会(第63回))

    知久 和寛, 仁平 高則, 鈴木 絵里香, 西本 完, 北岡 本光, 中井 博之, 大坪 研一

    応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌   4 ( 3 )   B51   2014年8月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:日本応用糖質科学会  

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  • Cp-13 新規ホスホリラーゼを用いたセロビオン酸の合成(ホスホリラーゼ,一般講演,日本応用糖質科学会平成26年度大会(第63回))

    斉藤 由華, 仁平 高則, 西本 完, 北岡 本光, 中井 博之, 大坪 研一

    応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌   4 ( 3 )   B51   2014年8月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:日本応用糖質科学会  

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  • S3-7 複合糖鎖の代謝に関与する新規βマンノシドホスホリラーゼの発見(応用糖質科学シンポジウム,日本応用糖質科学会平成26年度大会(第63回))

    知久 和寛, 仁平 高則, 鈴木 絵里香, 西本 完, 北岡 本光, 中井 博之, 大坪 研一

    応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌   4 ( 3 )   B63   2014年8月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:日本応用糖質科学会  

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  • Cp-7 1,2-β-グルカナーゼの同定(ホスホリラーゼ,一般講演,日本応用糖質科学会平成26年度大会(第63回))

    阿部 紘一, 中島 将博, 豊泉 大幸, 山下 哲郎, 中井 博之, 北岡 本光, 田口 速男

    応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌   4 ( 3 )   B49   2014年8月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:日本応用糖質科学会  

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  • Cp-11 Listeria innocua由来1,2-β-オリゴマンナンホスホリラーゼのX線結晶構造解析(ホスホリラーゼ,一般講演,日本応用糖質科学会平成26年度大会(第63回))

    津田 智弘, 仁平 高則, 北岡 本光, 中井 博之, 荒川 孝俊, 伏信 進矢

    応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌   4 ( 3 )   B50   2014年8月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:日本応用糖質科学会  

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  • Cp-9 Saccharophagus degradans 2-40由来4-O-β-D-マンノシル-D-グルコースホスホリラーゼによる非還元性二糖の生産(ホスホリラーゼ,一般講演,日本応用糖質科学会平成26年度大会(第63回))

    鈴木 絵里香, 知久 和寛, 仁平 高則, 西本 完, 北岡 本光, 中井 博之, 大坪 研一

    応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌   4 ( 3 )   B50   2014年8月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:日本応用糖質科学会  

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  • Cp-10 新規1,2-β-オリゴマンナンホスホリラーゼ(ホスホリラーゼ,一般講演,日本応用糖質科学会平成26年度大会(第63回))

    仁平 高則, 知久 和寛, 鈴木 絵里香, 西本 完, 北岡 本光, 伏信 進矢, 中井 博之, 大坪 研一

    応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌   4 ( 3 )   B50   2014年8月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:日本応用糖質科学会  

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  • Cp-5 ホスホリラーゼを用いた1,2-β-グルコオリゴ糖調製と1,2-β-グルカン大量合成(ホスホリラーゼ,一般講演,日本応用糖質科学会平成26年度大会(第63回))

    豊泉 大幸, 阿部 紘一, 中島 将博, 中井 博之, 北岡 本光, 田口 速男

    応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌   4 ( 3 )   B49   2014年8月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:日本応用糖質科学会  

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  • S2-5 Analysis of Surface Binding Sites (SBS) within GH62, GH13 and GH77(Recent Progress of Carbohydrate Bioengineering)

    Wilkens C., Cockbum D., Andersen S., Petersen B.O., Ruzanski C., Field R., Hindsgaul O., Nakai H., McCleary B., Smith A., Abou Hachem M., Svensson B.

    応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌   4 ( 3 )   B29   2014年8月

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    記述言語:英語   出版者・発行元:日本応用糖質科学会  

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  • ニゲラン代謝に関わるClostridium phytofermentans由来の新規ホスホリラーゼの発見

    仁平高則, 宮嶋双葉, 知久和寛, 北岡本光, 中井博之, 大坪研一

    応用糖質科学   4 ( 2 )   147 - 153   2014年5月

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    記述言語:日本語  

    DOI: 10.5458/bag.4.2_147

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  • Heterozygote IL36RN mutations in a European case of early-onset generalized pustular psoriasis challenge the concept of private mutation

    N. Rajan, N. Sinclair, H. Nakai, Y. Shimomura, S. Natarajan

    BRITISH JOURNAL OF DERMATOLOGY   170 ( 4 )   E11 - E11   2014年4月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究発表ペーパー・要旨(国際会議)  

    Web of Science

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  • セロビオン酸ホスホリラーゼの発見

    仁平高則, 斉藤由華, 西本完, 北岡本光, 五十嵐圭日子, 伏信進矢, 中井博之, 大坪研一

    日本農芸化学会大会講演要旨集(Web)   2014   2014年

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  • Cp-8 Chloroflexus aurantiacus J-10-fl由来の耐熱性コージビオースホスホリラーゼの機能解析(ホスホリラーゼ,一般講演,日本応用糖質科学会平成25年度大会(第62回))

    斉藤 由華, 仁平 高則, 知久 和寛, 北岡 本光, 中井 博之, 大坪 研一

    応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌   3 ( 3 )   B41   2013年8月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:日本応用糖質科学会  

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  • S3-4 ニゲラン代謝に関わるClostridium phytofermentans由来の新規ホスホリラーゼの発見(応用糖質科学シンポジウム,日本応用糖質科学会平成25年度大会(第62回))

    仁平 高則, 宮嶋 双葉, 知久 和寛, 北岡 本光, 中井 博之, 大坪 研一

    応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌   3 ( 3 )   B52   2013年8月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:日本応用糖質科学会  

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  • Cp-9 2-O-α-グルコシルグリセロールホスホリラーゼによるβGlc1P加水分解の分子機構および構造基盤(ホスホリラーゼ,一般講演,日本応用糖質科学会平成25年度大会(第62回))

    北岡 本光, 仁平 高則, 斉藤 由華, 東原 幸起, 伏信 進矢, 中井 博之, 大坪 研一

    応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌   3 ( 3 )   B42   2013年8月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:日本応用糖質科学会  

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  • Cp-7 新規酵素β-1,4-マンノシルN-アセチルグルコサミンホスホリラーゼ(ホスホリラーゼ,一般講演,日本応用糖質科学会平成25年度大会(第62回))

    鈴木 絵里香, 仁平 高則, 北岡 本光, 西本 完, 中井 博之, 大坪 研一

    応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌   3 ( 3 )   B41   2013年8月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:日本応用糖質科学会  

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  • ホスホリラーゼを利用した安価原料からの機能性オリゴ糖合成

    仁平高則, 中井博之, 大坪研一

    Bio Ind   30 ( 5 )   47 - 54   2013年5月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:シーエムシー出版  

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  • Key aromatic residues at subsites +2 and +3 of glycoside hydrolase family 31 .ALPHA.-glucosidase contribute to recognition of long-chain substrates

    TAGAMI Takayoshi, OKUYAMA Masayuki, NAKAI Hiroyuki, KIM Young-min, MORI Haruhide, TAGUCHI Kazunori, SVENSSON Birte, KIMURA Atsuo

    Biochimica et Biophysica Acta   1834 ( 1 )   329 - 335   2013年1月

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  • 糖質関連酵素が触媒する糖質合成反応を活用した新規オリゴ糖の生産開発

    中井博之, 仁平高則, 北岡本光, 大坪研一

    応用糖質科学   2 ( 4 )   223 - 224   2012年11月

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    記述言語:日本語  

    DOI: 10.5458/bag.2.4_223

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  • Bp1-7 Acholeplasma laidlawii PG-8A由来ラミナリビオースホスホリラーゼ(ホスホリラーゼおよび関連酵素,一般講演,日本応用糖質科学会平成24年度大会(第61回))

    仁平 高則, 斉藤 由華, 北岡 本光, 西本 完, 中井 博之, 大坪 研一

    応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌   2 ( 3 )   B37   2012年8月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:日本応用糖質科学会  

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  • S3-5 The utilization routes of iso maltooligosaccharides by probiotics : an enzymatic and genetic overview

    Abou Hachem M., Moller M., Fredslund F., Andersen J.M., Majumder A., Nakai H., Lahtinen S.J., Yong J.-G., Klaenhammer T.R., Barrangou R., Lo Leggio L., Svensson B.

    応用糖質科学 : 日本応用糖質科学会誌   2 ( 3 )   B59   2012年8月

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    記述言語:英語   出版者・発行元:日本応用糖質科学会  

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  • プレバイオティクスとして有用な新規機能性オリゴ糖の生産開発

    中井博之, SVENSSON Birte, 大坪研一

    応用糖質科学   2 ( 2 )   117 - 121   2012年5月

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    記述言語:日本語  

    DOI: 10.5458/bag.2.2_117

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  • 高機能性食品素材として有用なオリゴ糖の生産技術開発とその高度利用 加リン酸分解酵素(ホスホリラーゼ)を利用して高収率生産

    中井博之

    化学と生物   49 ( 10 )   669 - 671   2011年10月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:Japan Society for Bioscience, Biotechnology, and Agrochemistry  

    DOI: 10.1271/kagakutoseibutsu.49.669

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  • 新しく見出されたイソマルトオリゴ糖不均化酵素の遺伝子クローニングと異種宿主発現

    鐘ケ江倫世, KIM Young‐Min, 中井博之, 本同宏成, 奥山正幸, 森春英, 木村淳夫

    日本農芸化学会大会講演要旨集   2008   191   2008年3月

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    記述言語:日本語  

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  • 新規なイソマルトオリゴ糖生成酵素の単離と性質

    鐘ケ江倫世, KIM Young‐Min, 中井博之, 奥山正幸, 森春英, 木村淳夫

    J Appl Glycosci   54 ( Suppl. )   43   2007年7月

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    記述言語:日本語  

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  • ホタテガイ由来塩素イオン依存性α‐amylaseの構造と機能

    飯塚貴久, 小林和之, 中井博之, 奥山正幸, 森春英, 奈良岡哲志, 千葉誠哉, 木村淳夫

    J Appl Glycosci   54 ( Suppl. )   32   2007年7月

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    記述言語:日本語  

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  • デキストラン関連酵素が有するデキストラン結合ドメインの機能解析

    中井博之, 金泳民, 原口慶子, 奥山正幸, 森春英, 舟根和美, 小林幹彦, 木村淳夫

    日本農芸化学会大会講演要旨集   2007   65   2007年3月

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    記述言語:日本語  

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  • ホタテガイ閉殻筋由来α‐glucosidaseのマルチプルフォームの構造解析

    飯塚貴久, 中井博之, 奥山正幸, 森春英, 奈良岡哲志, 千葉誠哉, 木村淳夫

    日本農芸化学会大会講演要旨集   2007   206   2007年3月

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    記述言語:日本語  

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  • クロマルハナバチ(Bombus terrestris)α‐グルコシダーゼ:アロステリック酵素の性質解明と遺伝子発現

    佐藤なつ子, 鳥羽瀬輝, 中井博之, 西本完, 森春英, 奥山正幸, 木村淳夫

    生化学   3P-0212   2007年

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    記述言語:日本語  

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  • クロマルハナバチ,Bombus ignitus,α‐GlucosidaseアイソザイムIの長鎖基質認識に関わるアミノ酸残基の決定

    佐藤なつ子, 中井博之, 森春英, 奥山正幸, 千葉誠哉, 木村淳夫

    J Appl Glycosci   53 ( Suppl. )   31   2006年8月

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  • GST融合タンパク質を用いたイネα‐glucosidaseの澱粉粒吸着および分解機構の解析

    谷沢茂紀, 中井博之, 奥山正幸, 森春英, 千葉誠哉, 木村淳夫

    J Appl Glycosci   53 ( Suppl. )   43   2006年8月

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  • ホタテガイ閉殻筋に存在するイオン要求性α‐glucosidaseの精製とその諸性質

    飯塚貴久, 中井博之, 奥山正幸, 森春英, 奈良岡哲志, 千葉誠哉, 木村淳夫

    J Appl Glycosci   53 ( Suppl. )   30   2006年8月

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  • セイヨウミツバチα‐glucosidaseアイソザイムIIのβ→αループ8変異酵素の機能解析

    佐藤なつ子, 中井博之, 森春英, 奥山正幸, 千葉誠哉, 木村淳夫

    日本農芸化学会大会講演要旨集   2006   154   2006年3月

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  • セイヨウミツバチα‐Glucosidase IIのV167N変異酵素は高いK<sub>m</sub>およびk<sub>0</sub>を与え,マルハナバチα‐Glucosidase IIの性質を示した

    佐藤なつ子, 中井博之, 奥山正幸, 森春英, 千葉誠哉, 木村淳夫

    J Appl Glycosci   52 ( Suppl. )   24   2005年7月

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  • —ホタテガイ中腸腺由来イオン依存性α‐glucosidase—

    飯塚貴久, 福川太郎, 西岡謙吾, 中井博之, 奥山正幸, 森春英, 吉田孝, 千葉誠哉, 木村淳夫

    J Appl Glycosci   52 ( Suppl. )   26   2005年7月

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  • 植物α‐Glucosidase,特にイネ酵素の分子解析と発芽時の澱粉粒分解に関する研究

    中井博之, 谷沢茂紀, 松原一樹, 奥山正幸, 森春英, 千葉誠哉, 佐野芳雄, 木村淳夫

    J Appl Glycosci   52 ( Suppl. )   52   2005年7月

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  • 植物α‐GlucosidaseのC末端領域は単独で澱粉粒に吸着する‐GST融合タンパク質による解析‐

    谷沢茂紀, 中井博之, 奥山正幸, 森春英, 千葉誠哉, 木村淳夫

    J Appl Glycosci   52 ( Suppl. )   25   2005年7月

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  • イネGlycoside Hydrolase Family 31様遺伝子の発現解析

    中井博之, 伊藤真吾, 奥山正幸, 森春英, 千葉誠哉, 佐藤芳雄, 木村淳夫

    日本農芸化学会大会講演要旨集   2005   30   2005年3月

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  • イネGlycoside hydrolase family 31様タンパク質の機能解析

    谷沢茂紀, 中井博之, 奥山正幸, 森春英, 千葉誠哉, 佐野芳雄, 木村淳夫

    日本農芸化学会大会講演要旨集   2005   31   2005年3月

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  • クロマルハナバチ,Bombus ignitus,α‐Glucosidaseアイソザイムの精製・諸性質および一次構造の解析

    佐藤なつ子, 高橋有志, 中井博之, 光畑雅宏, 奥山正幸, 森春英, 千葉誠哉, 木村淳夫

    日本農芸化学会大会講演要旨集   2005   30   2005年3月

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  • 植物α‐Glucosidaseの生澱粉吸着に関与するアミノ酸残基の解析

    中井博之, 谷沢茂紀, 奥山正幸, 森春英, 山本健, 佐野芳雄, 千葉誠哉, 木村淳夫

    J Appl Glycosci   51 ( Suppl. )   41   2004年7月

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  • クロマルハナバチ,Bombus ignitus,α‐Glucosidase Iの精製と諸性質

    佐藤なつ子, 高橋有志, 中井博之, 光畑雅宏, 奥山正幸, 森春英, 千葉誠哉, 木村淳夫

    J Appl Glycosci   51 ( Suppl. )   40   2004年7月

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  • 植物α‐Glucosidaseに見出された新規な生澱粉結合部位の解析

    中井博之, 奥山正幸, 森春英, 山本健, 千葉誠哉, 佐野芳雄, 木村淳夫

    日本農芸化学会大会講演要旨集   2004   254   2004年3月

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  • 赤米および日本晴で発芽時に作用するα‐Glucosidaseの一次構造の解析

    中井博之, 伊藤達也, 松原一樹, 奥山正幸, 森春英, 千葉誠哉, 佐野芳雄, 木村淳夫

    日本農芸化学会大会講演要旨集   2003   100   2003年3月

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  • 赤米α‐Glucosidaseの限定分解とそれによる諸性質への影響

    中井博之, 伊藤達也, 森春英, 千葉誠哉, 木村淳夫

    日本農芸化学会大会講演要旨集   2002   127   2002年3月

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  • 赤米α‐Glucosidaseの精製と諸性質

    中井博之, 林正敏, 森春英, 木村淳夫, 千葉誠哉

    日本農芸化学会誌   75   65   2001年3月

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受賞

  • ポスター賞

    2021年9月   日本応用糖質科学会  

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  • 2020年度大会トピックス賞

    2020年3月   日本農芸化学会  

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  • 奨励賞

    2017年9月   日本応用糖質科学会  

    中井 博之

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  • 2017年度大会トピックス賞

    2017年3月   日本農芸化学会  

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  • 長瀬研究振興賞

    2016年4月   公益財団法人 長瀬科学技術振興財団  

    中井 博之

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  • 安藤百福賞発明発見奨励賞

    2016年3月   公益財団法人 安藤スポーツ・食文化振興財団  

    中井 博之

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  • 食の新潟国際賞 21世紀希望賞

    2014年10月   公益財団法人 食の新潟国際賞財団  

    中井 博之

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  • インテリジェント・コスモス奨励賞

    2013年5月   公益財団法人 インテリジェント・コスモス学術振興財団  

    中井 博之

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  • 酵素応用シンポジウム研究奨励賞

    2012年6月   一般財団法人 天野エンザイム科学技術振興財団  

    中井 博之

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  • Poster Award

    2010年7月   Plant Polysaccharide and Applied Glycoscience Workshop 2010  

    中井 博之

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  • 1st Poster Award

    2007年4月   7th Carbohydrate Bioengineering Meeting  

    中井 博之

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  • Best Poster Award

    2004年7月   Plant Polysaccharide Workshop  

    中井 博之

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  • 平成16年度大会記者会見報道用トピックス賞

    2004年3月   日本農芸化学会  

    中井 博之

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共同研究・競争的資金等の研究

  • 糖質の構造と生理活性の相関解明に向けた機能性糖質の創生

    研究課題/領域番号:22K05437

    2022年4月 - 2025年3月

    制度名:科学研究費助成事業

    研究種目:基盤研究(C)

    提供機関:日本学術振興会

    中井 博之

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    配分額:4290000円 ( 直接経費:3300000円 、 間接経費:990000円 )

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  • 糖資化性改変大腸菌を用いた新規酵素特化型スクリーニング

    研究課題/領域番号:19K05824

    2019年4月 - 2022年3月

    制度名:科学研究費助成事業

    研究種目:基盤研究(C)

    提供機関:日本学術振興会

    中井 博之

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    配分額:4290000円 ( 直接経費:3300000円 、 間接経費:990000円 )

    ホスホリラーゼは、無機リン酸存在下で糖質のグリコシド結合を非還元末端側から順次加リン酸分解する酵素である。その反応は可逆的であり、オリゴ糖を効率的に合成することが出来る上、厳密な位置選択性を活かして目的とするオリゴ糖の選択的合成が可能である。しかしながら、合成可能なオリゴ糖の種類はホスホリラーゼの種類に依存する。今後合成可能なオリゴ糖のバリエーション拡大には、新たな反応特異性を示すホスホリラーゼの発見が必須である。本研究では、バイオインフォマティクス手法に加え、糖資化性を改変した大腸菌を用いた新規ホスホリラーゼの探索に特化したメタゲノミクススクリーニング手法により新規酵素の探索を試みた。

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  • メタゲノミクスを活用したオリゴ糖合成酵素の網羅的探索及び機能性オリゴ糖の創出

    研究課題/領域番号:16K07688

    2016年4月 - 2019年3月

    制度名:科学研究費助成事業

    研究種目:基盤研究(C)

    提供機関:日本学術振興会

    中井 博之

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    配分額:4810000円 ( 直接経費:3700000円 、 間接経費:1110000円 )

    ホスホリラーゼは、無機リン酸存在下で糖質のグリコシド結合を非還元末端側から順次加リン酸分解する酵素である。その反応は可逆的であり、オリゴ糖を効率的に合成することが出来る上、厳密な位置選択性を活かして目的とするオリゴ糖の選択的合成が可能である。しかしながら、合成可能なオリゴ糖の種類はホスホリラーゼの種類に依存する。今後合成可能なオリゴ糖のバリエーション拡大には、新たな反応特異性を示すホスホリラーゼの発見が必須である。そこで本研究では、糖資化性を改変した大腸菌を用いて、新規ホスホリラーゼの探索に特化したメタゲノミクススクリーニング手法を開発した。

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  • 腸内細菌に特徴的なATP消費抑制型N-グリカン代謝経路の解明

    研究課題/領域番号:26440022

    2014年4月 - 2017年3月

    制度名:科学研究費助成事業

    研究種目:基盤研究(C)

    提供機関:日本学術振興会

    仁平 高則, 中井 博之

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    配分額:5200000円 ( 直接経費:4000000円 、 間接経費:1200000円 )

    数種の腸内細菌で見出される加リン酸分解酵素(ホスホリラーゼ)が関与するATP消費抑制型N-グリカン代謝経路を解明するために,本代謝経路の鍵酵素であるβ-1,4-マンノシル-N-アセチルグルコサミンホスホリラーゼの反応速度論的および構造学的解析を進めた。結晶が得られたBacteroides thetaiotaomicron由来の当該酵素について現在構造解析中である。また当該酵素遺伝子の近傍に存在し,N-グリカンの代謝に寄与することが推測される機能未知遺伝子について調査するために,当該遺伝子がコードするタンパク質を各種構造のN-グリカンに作用させたが,酵素反応は確認されず性質決定に至らなかった。

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  • 新規ホスホリラーゼの網羅的探索を基軸とする機能性オリゴ糖ライブラリーの拡充

    研究課題/領域番号:26850062

    2014年4月 - 2016年3月

    制度名:科学研究費助成事業

    研究種目:若手研究(B)

    提供機関:日本学術振興会

    中井 博之

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    配分額:3900000円 ( 直接経費:3000000円 、 間接経費:900000円 )

    生体内糖質代謝に関与する糖質加リン酸分解酵素(ホスホリラーゼ)によるオリゴ糖合成の収率は高く、産業上有用な酵素になり得る。しかしながら、既知のホスホリラーゼは他の糖質関連酵素に比べて報告例が少なく、今後生産可能なオリゴ糖のバリエーション拡大には、新たなホスホリラーゼの発見が必須であった。そこでglycoside Hydrolase Family 130に属するホスホリラーゼ様タンパク質の機能解析を行った結果、β-1,2-マンノオリゴ糖に特異性を示す、これまで報告例のない新規なホスホリラーゼを発見することが出来た。

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  • 新規ホスホリラーゼを活用した機能性オリゴ糖のライブラリー構築及び網羅的機能性評価

    研究課題/領域番号:24780095

    2012年4月 - 2014年3月

    制度名:科学研究費助成事業

    研究種目:若手研究(B)

    提供機関:日本学術振興会

    中井 博之

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    配分額:4680000円 ( 直接経費:3600000円 、 間接経費:1080000円 )

    生体内糖質代謝に関与する糖質加リン酸分解酵素(ホスホリラーゼ)によるオリゴ糖合成収率は高く、産業上有用な酵素になり得る。しかしながら、既知のホスホリラーゼの報告例は少なく、今後生産可能なオリゴ糖のバリエーション拡大には、新たなホスホリラーゼの発見が必須であった。そこでglycoside hydrolase family 65、94、130に属する微生物由来のホスホリラーゼ様タンパク質の機能性解析を行った結果、これまで報告例のない基質特異性を示すホスホリラーゼを複数発見することができた。また今回得られた新規酵素群の糖受容体特異性を調査することで、多種多様なヘテロオリゴ糖の生産にも成功した。

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  • 新規糖質加リン酸分解酵素を活用した機能性オリゴ糖のライブラリー化

    研究課題/領域番号:23880010

    2011年8月 - 2013年3月

    制度名:科学研究費助成事業

    研究種目:研究活動スタート支援

    提供機関:日本学術振興会

    中井 博之

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    配分額:3250000円 ( 直接経費:2500000円 、 間接経費:750000円 )

    生体内糖質代謝に関与する糖質加リン酸分解酵素(ホスホリラーゼ)による糖質合成収率は極めて高く、産業上有用な酵素になり得る。しかしながら、既知のホスホリラーゼは14種類のみと報告例が少なく、今後生産可能なオリゴ糖のバリエーション拡大には、新たなホスホリラーゼの発見が必須であった。本研究では様々な生物種のゲノム情報を活用して、これまでに報告例のない新規なホスホリラーゼを見出し、各種酵素の糖受容体特異性を明らかにすることで、新規オリゴ糖のライブラリー化を試みた。まず真正細菌由来のホスホリラーゼ様タンパク質(Cphy1874、Cphy1019)をコードする遺伝子をPCR法により単離し、大腸菌による異種宿主発現系を確立した。Cphy1874はリン酸存在下でグルコース2分子がα-1,3結合したニゲロースを加リン酸分解すること、さらにβ-グルコース1-リン酸(糖供与体)とグルコース(糖受容体)を出発材料とした際はニゲロースを高収率合成することが分かった。本結果により、Cphy1874はこれまでに報告例のない新規加リン酸分解酵素ニゲロースホスホリラーゼであることが明らかになった。Cphy1019については、リン酸存在下で既知のグルコ2糖に対して加リン酸分解活性を示さなかったが、糖質合成反応にてL-ラムノースを糖受容体とした際にのみ合成活性を示した。反応生成物の構造を核磁気共鳴分光法にて確認したところ、3-O-α-D-グルコシル-L-ラムノースであったことから、Cphy1019は新規加リン酸分解酵素3-O-α-D-グルコシル-L-ラムノースホスホリラーゼであることが判明した。今回得られた両新規酵素の詳細な糖受容体特異性を調査することで、これまでに6個の新規α-1,3グルコシルヘテロ2糖の合成に成功している。

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担当経験のある授業科目

  • 応用生命・食品科学セミナーI

    2024年
    -
    現在
    機関名:新潟大学

  • 統合化学入門

    2024年
    -
    現在
    機関名:新潟大学

  • 卒業論文I

    2023年
    -
    現在
    機関名:新潟大学

  • 科学英語演習

    2023年
    -
    現在
    機関名:新潟大学

  • 食品科学演習II

    2023年
    -
    現在
    機関名:新潟大学

  • 卒業論文II

    2023年
    -
    現在
    機関名:新潟大学

  • 食品科学演習I

    2023年
    -
    現在
    機関名:新潟大学

  • 分析化学実験(農)

    2022年
    -
    現在
    機関名:新潟大学

  • Topics in Food Sciences

    2022年
    機関名:新潟大学

  • 農学入門I

    2022年
    機関名:新潟大学

  • 米利用科学論

    2022年
    機関名:新潟大学

  • 農学入門II

    2022年
    機関名:新潟大学

  • 糖質科学論

    2021年
    機関名:新潟大学

  • スタディ・スキルズAIIc

    2021年
    機関名:新潟大学

  • スタディ・スキルズAIc

    2021年
    機関名:新潟大学

  • 応用生命・食品科学概論

    2021年
    機関名:新潟大学

  • 食品科学概論

    2020年
    -
    現在
    機関名:新潟大学

  • 応用生命・食品科学セミナーⅡ

    2020年
    機関名:新潟大学

  • 農産食品学

    2018年
    -
    現在
    機関名:新潟大学

  • 応用生命・食品科学概論

    2018年
    -
    2021年
    機関名:新潟大学

  • 農学入門Ⅱ

    2018年
    機関名:新潟大学

  • 応用生命・食品科学特論

    2018年
    機関名:新潟大学

  • 基礎化学

    2017年
    -
    現在
    機関名:新潟大学

  • 食と健康の科学

    2017年
    -
    現在
    機関名:新潟大学

  • 農学入門Ⅰ

    2017年
    -
    2018年
    機関名:新潟大学

  • 生物化学実験

    2016年
    -
    2022年
    機関名:新潟大学

  • Topics in Food Sciences

    2016年
    -
    2022年
    機関名:新潟大学

  • 食品安全学

    2016年
    -
    2022年
    機関名:新潟大学

  • 食品製造学

    2016年
    -
    2017年
    機関名:新潟大学

  • 自然科学総論Ⅳ

    2016年
    機関名:新潟大学

  • 米利用科学論

    2015年
    -
    2022年
    機関名:新潟大学

  • 食品・栄養科学演習Ⅰ

    2015年
    -
    2019年
    機関名:新潟大学

  • 食品・栄養科学演習Ⅱ

    2015年
    -
    2018年
    機関名:新潟大学

  • 食品・栄養科学実験

    2015年
    -
    2018年
    機関名:新潟大学

  • 実地見学

    2015年
    -
    2016年
    機関名:新潟大学

  • 研究発表演習(中間発表)

    2015年
    機関名:新潟大学

  • 米科学論

    2015年
    機関名:新潟大学

  • 生命・食料科学セミナーBⅠ

    2015年
    機関名:新潟大学

  • 文献詳読Ⅰ

    2015年
    機関名:新潟大学

  • 生命・食料科学特定研究BⅠ

    2015年
    機関名:新潟大学

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